家蚕素Ⅱ基因原核表达及蛋白纯化

编号 zgly0000868699

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕素Ⅱ基因原核表达及蛋白纯化

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 徐欣  刘朝阳  崔海波  杨洋  郭晓琪  张涛  刘庆信  崔为正 

作者单位 山东农业大学林学院  泰安泰山成通制丝有限公司 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2014(1)

页码 8-12

年份 2014 

关键词 家蚕  类胰岛素肽  家蚕素  基因克隆  原核表达  蛋白纯化 

文摘内容 【目的】建立一种简便、快速且能大量获得家蚕素Ⅱ(bombyxin-Ⅱ,BBXⅡ)的有效方法。【方法】运用RTPCR技术得到bombyxin-Ⅱ基因全长cDNA序列,采用原核表达技术对该基因进行异源表达,并利用亲和层析的方法得到纯化的BBXⅡ蛋白。【结果】从家蚕Bombyx mori头部mRNA中经过反转录获得bombyxin-Ⅱ基因的cDNA,并构建了原核表达载体pET28a-BBXⅡ,经过异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,使BBXⅡ获得了大量表达,进一步用HisTrap HP亲和层析,成功得到大量纯化的BBXⅡ。