水疱性口炎病毒N基因原核表达载体的构建及表达

编号 zgly0001276204

文献类型 期刊论文

文献题名 水疱性口炎病毒N基因原核表达载体的构建及表达

作者 郑增忍  王海霞  龚振华  张彦明  李葳  刘俊辉 

作者单位 西北农林科技大学动物科技学院  农业部动物及动物产品卫生质量监督检验测试中心  农业部动物及动物产品卫生质量监督检验测试中心 陕西杨凌712100农业部动物及动物产品卫生质量监督检验测试中心山东青岛266032  陕西杨凌712100  山东青岛266032  山东青岛266032 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2004年05期

年份 2004 

分类号 S852.659.1 

关键词 水疱性口炎病毒  N基因  原核表达载体 

文摘内容 针对水疱性口炎病毒(VSV)N基因设计特异性引物,在引物中分别加入EcoR 和Xho 酶切位点。RT-PCR扩增后得到目的基因,将其克隆到表达载体pET30c,连接产物转化于DH5α菌株,在含Kan+的平板上37℃培养24h,然后挑取白色菌落,鉴定为阳性者,转化于BL21菌株,再经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导获得高效表达。表达融合蛋白分子质量为53ku(目的蛋白大约47ku),同预期蛋白大小相近。Westernblot检测表明,其能与本病毒阳性血清发生特异性反应,表达蛋白有望成为有价值的VSV诊断抗原。