利用正交设计优化异色瓢虫SRAP-PCR反应体系

编号 zgly0000601092

文献类型 期刊论文

文献题名 利用正交设计优化异色瓢虫SRAP-PCR反应体系

作者 关桦楠  迟德富  宇佳  董婧 

作者单位 东北林业大学生命科学学院 

母体文献 昆虫知识 

年卷期 2008,45(1)

页码 156-161

年份 2008 

分类号 S823  S476.2 

关键词 异色瓢虫  SRAP  正交设计  分子标记  天敌昆虫 

文摘内容 利用正交设计L16(4^5)对异色瓢虫Harmonia axyridis(Pallas)SRAP-PCR反应体系的5个因素(Taq 酶、Mg^2＋、模板DNA、dNTPs、引物)在4个水平上进行优化试验，试验结果用DIS和MINITAB软件进行分析，建立了异色瓢虫SRAP-PCR反应的最佳体系，即在20止体系中模板50—100ng、引物0．25μmol／L、dNTPs 0．1mmol／L、Taq DNA聚合酶1．5U、Mg^2＋0．375～0．625mmol／L。并对反应体系进行梯度退火试验，得到最佳退火温度为50．3℃。这一优化系统的建立，为今后利用SRAP技术进行瓢虫遗传图谱的构建、多态性分析和基因定位奠定了技术基础。