正交设计对‘红阳’猕猴桃ISSR反应体系的优化研究

编号 zgly0000694975

文献类型 期刊论文

文献题名 正交设计对‘红阳’猕猴桃ISSR反应体系的优化研究

学科分类 220.35;野生动物保护与管理

作者 邱利娜  廖明安  李明章  王丽华  郑晓琴 

作者单位 四川农业大学园艺学院  四川省自然资源科学研究院 

母体文献 北方园艺 

年卷期 2010(16)

页码 125-128

年份 2010 

分类号 S663.4 

关键词 ‘红阳’猕猴桃  正交设计  ISSR  反应体系 

文摘内容 以‘红阳’猕猴桃及其杂交F1代为试材,通过正交设计对ISSR-PCR扩增反应的影响因子进行优化,初步确立了适合‘红阳’猕猴桃ISSR-PCR反应体系: 总体积20μL,10×PCR buffer2.0μL,Mg2+0.75 mmol/L,Taq酶1.5 U,模板DNA 60 ng,引物1.25μmol/L,dNTPs 0.15mmol/L。扩增程序: 94℃预变性7 min,94℃变性30 s,50-58℃退火45 s,72℃延伸2 min,45个循环,72℃延伸7 min。引物UBC841的最佳退火温度为58.5℃。应用该优化反应体系,用UBC835对35份杂交F1代DNA进行ISSR-PCR扩增,结果显示优化后的反应体系具有较高的稳定性。