花吊丝竹ISSR-PCR反应体系的正交优化

编号 zgly0001566392

文献类型 期刊论文

文献题名 花吊丝竹ISSR-PCR反应体系的正交优化

作者 瞿印权  徐雯  沈露  陈剑成  何天友  魏建文  荣俊冬  郑郁善 

作者单位 福建农林大学林学院  福建农林大学艺术学院园林学院  福建省东山赤山国有防护林场 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2017年06期

年份 2017 

分类号 Q943.2  S795 

关键词 花吊丝竹  ISSR  正交设计  反应体系 

文摘内容 本研究利用L16（45）正交试验设计,对影响ISSR-PCR反应体系的5个影响因素(Mg2+浓度,d NTPs浓度,Taq DNA聚合酶浓度,引物浓度及模板DNA含量)进行优化。并在5060℃范围内摸索引物UBC845的最适退火温度,并建立了花吊丝竹的最佳ISSR-PCR反应体系:2.5 mmol/L Mg2+,0.25 mmol/L d NTPs,1.50 U Taq DNA聚合酶,0.5μmol/L引物,80 ng模板DNA,2μL 10x Buffer,9.5μL dd H2O,ISSR-PCR扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性45 s;52.7℃退火30 s,72℃延伸90 s,35个循环;72℃延伸10 min,4℃保存。利用优化的反应体系从100条引物中筛选出16条多态性较好的引物,该体系的建立有助于花吊丝竹种质资源遗传多样性分析和指纹图谱的构建。