正交优化法建立沙打旺ISSR-PCR最佳反应体系

编号 zgly0000476854

文献类型 期刊论文

文献题名 正交优化法建立沙打旺ISSR-PCR最佳反应体系

作者 陈志宏  黄琳凯  张新全  王志刚 

作者单位 全国畜牧兽医总站畜禽牧草种质资源保存利用中心  四川农业大学动物科技学院草业科学系 

母体文献 安徽农业科学 

年卷期 2006,34(13)

页码 2980-2982

年份 2006 

分类号 Q946-33 

关键词 沙打旺  ISSR  正交优化  反应体系 

文摘内容 根据正交试验设计的原理。设计了探索性正交试验和细调性正交试验来确定沙打旺ISSR-PCR体系中各成分的浓度。得到既稳定又能扩出最多条带的适合沙打旺的ISSR-PCR最佳反应体系, 即20m的反应体系中含有1×buffer, dNTP0.2mmol/L, Taq酶1.0U, 引物0.3μmol/L, Mg^2+ 2.5mmol/L, DNA模板2.5ng/出。然后对沙打旺ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火试验, 得到这条引物的最佳退火温度为54.1℃。这一最佳体系的建立为今后利用ISSR标记技术, 研究沙打旺的遗传多样性提供了标准化程序。