文昌锥SRAP-PCR体系优化及有效引物筛选

编号 zgly0001724183

文献类型 期刊论文

文献题名 文昌锥SRAP-PCR体系优化及有效引物筛选

作者 孙秀秀  陈加利  杨立荣  云勇  戚华沙  郑道君 

作者单位 海南省农业科学院热带园艺研究所 

母体文献 西南林业大学学报:自然科学 

年卷期 2021,41(1)

页码 39-46

年份 2021 

分类号 S792.99 

关键词 文昌锥  SRAP  反应体系  引物 

文摘内容 通过单因素试验和正交试验相结合,分析DNA、引物、dNTPs、Taq DNA聚合酶4种因素对文昌锥SRAP-PCR扩增结果的影响,优化建立文昌锥SRAP-PCR体系。结果表明:文昌锥基因组DNA浓度和dNTPs浓度过低或过高均扩增不出产物,而引物浓度和Taq酶用量的增加能提高扩增效率。在适宜浓度范围内,各个因素对文昌锥SRAP-PCR扩增影响大小依次为:引物=dNTPs》Taq酶》DNA;最优反应体系为:总体系为20μL时,DNA 20 ng,引物0.6μmol/L,dNTPs0.15 mmol/L和Taq酶4 U。经验证,该体系获得的扩增产物清晰、稳定;筛选获得45对有效性引物组合多态性好,可应用于SRAP分子标记技术在文昌锥资源研究。