赤皮青冈ISSR-PCR反应体系的建立与优化

编号 zgly0000910580

文献类型 期刊论文

文献题名 赤皮青冈ISSR-PCR反应体系的建立与优化

作者 朱品红  李志辉  杨模华 

作者单位 中南林业科技大学林学院 

母体文献 中南林业科技大学学报 

年卷期 2014(6)

页码 61-65+80

年份 2014 

关键词 赤皮青冈  ISSR-PCR  正交设计  单因素试验  优化 

文摘内容 为建立适宜于赤皮青冈ISSR分析的扩增体系,以赤皮青冈叶片基因组DNA为材料,采用单因素和正交设计相结合的方法系统地测试模板DNA、Mg2+、引物、磷酸碱基脱氧核苷(dNTPs)浓度,Taq DNA聚合酶用量和退火温度这6个因素对ISSR-PCR反应结果的影响。综合分析表明:优化后的最佳反应体系为20μL反应总体系中,含20 ng模板DNA,2.5 mmoL/L Mg2+,0.2 mmoL/L dNTPs,1.0 U Taq DNA聚合酶,0.2μmoL/L引物;UBC 808号作引物最佳退火温度为59.3℃。这一优化体系的建立为进一步开展赤皮青冈遗传多样性的ISSR分析奠定了基础。