桃蚜基因组DNA提取及SSR反应体系优化和应用

编号 zgly0001359395

文献类型 期刊论文

文献题名 桃蚜基因组DNA提取及SSR反应体系优化和应用

作者 刘永刚  漆永红  赵丽娟  吕和平 

作者单位 甘肃省农业科学院植物保护研究所  甘肃省农业科学院生物技术研究所 

母体文献 植物保护 

年卷期 2009年04期

年份 2009 

分类号 S433 

关键词 桃蚜  基因组DNA  提取方法  SSR  体系优化 

文摘内容 针对蚜虫体型微小,体表有外骨骼等特点对改进的醋酸钾(KAC)法作了优化,优化后的方法可在常温条件下更加简易和有效地提取高质量的单头蚜虫基因组DNA,结果表明,DNA样品的A260/280值普遍在1.6~1.9之间,电泳检测基因组DNA纯度和完整性较好。同时在20μL的反应体系中将PCR的5个主要成分分别设定10个浓度梯度,研究了适合桃蚜SSR分子标记的优化体系,结果表明,最适宜的优化浓度分别为:1.5 mmol/L Mg2+,0.25 mmol/L dNTP,1.0UTaq酶,40 ng/μL模板DNA,25 ng/μL引物。利用甘肃省酒泉地区马铃薯桃蚜来验证此优化体系,30%聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果显示,扩增产物大多在100~300 bp,多态性高,且反应体系的稳定性和可重复性好。