油橄榄ISSR-PCR反应体系优化与引物筛选

编号 zgly0000777970

文献类型 期刊论文

文献题名 油橄榄ISSR-PCR反应体系优化与引物筛选

学科分类 220.45;经济林学

作者 李瑞  陈少瑜  宁德鲁  李勇杰  毛云玲 

作者单位 云南省林业科学院  云南省林业科学院 

母体文献 安徽农业科学 

年卷期 2012,40(10)

页码 5797-5799

年份 2012 

分类号 S565 TQ644.1 

关键词 油橄榄  基因组DNA  体系优化  引物筛选 

文摘内容 [目的]对油橄榄ISSR-PCR反应体系进行优化,并筛选出多态性ISSR引物。[方法]以油橄榄嫩叶片提取的基因组DNA为模板,通过单因子试验针对反应体系主要因子Mg2+、dNTPs、引物浓度及模板用量进行油橄榄ISSR-PCR反应体系优化。[结果]优化的油橄榄ISSR-PCR反应体系为: 总体系20μl中含1×Taq Buffer,3.5 mmol/L Mg2+,0.4 mmol/L dNTPs,1.0μmol/L引物,1.0 U Taq DNA聚合酶,20 ng DNA模板。反应程序为: 94℃预变性5 min;94℃变性30 s,52～55℃退火30 s,72℃延伸2 min,40个循环;72℃延伸10 min,4℃保存。同时利用上述反应体系和反应程序筛选出了扩增稳定、多态性高、扩增条带清晰的ISSR引物11条。[结论]为进一步油橄榄种质资源的多样性研究和品种鉴定奠定了基础。