坦布苏病毒MM1775株反向遗传操作系统的建立

编号 zgly0001487917

文献类型 期刊论文

文献题名 坦布苏病毒MM1775株反向遗传操作系统的建立

作者 闫大为  吴晓刚  李雪松  石迎  冯琳琳  崔宏锐  李国新  李泽君 

作者单位 中国农业科学院上海兽医研究所 

母体文献 中国动物传染病学报 

年卷期 2015年04期

年份 2015 

分类号 S852.65 

关键词 坦布苏病毒  MM1775  反向遗传操作系统 

文摘内容 本研究将坦布苏病毒MM1775株全基因组分3段克隆,获得3个重组质粒,利用融合PCR方法扩增得到5’端含有T 7启动子的病毒全长c DNA,经体外转录得到感染性的RNA,将RNA转染DF-1细胞,48 h后出现细胞病变。当细胞病变达到90%,将细胞上清接种DF-1细胞,72 h后进行间接免疫荧光(indirect immunofulorescence,IFA)和RT-PCR鉴定,结果表明拯救病毒成功。序列测定结果显示,拯救毒的全基因组序列与亲本毒完全一致,表明MM1775反向遗传操作系统构建成功,为进一步研究坦布苏病毒致病性等相关分子机制奠定了基础。