编号
zgly0001541732
文献类型
期刊论文
文献题名
H3N2亚型犬流感病毒反向遗传操作系统的建立
作者
段旭彤
荣广玉
田巧珍
申伟霞
李雪松
陈鸿军
刘芹防
杨健美
滕巧泱
赵凯
李泽君
作者单位
黑龙江大学
中国农业科学院上海兽医研究所
母体文献
中国动物传染病学报
年卷期
2017年03期
年份
2017
分类号
S852.655
关键词
犬流感病毒
H3N2亚型
反向遗传操作系统
文摘内容
H3N2亚型犬流感病毒(Canine influenza virus,CIV)可以在犬中迅速的传播,甚至引起犬的死亡,也可感染其他哺乳动物。目前该病毒致病的分子机制尚不清楚。为此,本研究采用RT-PCR技术扩增犬流感病毒A/Canine/Zhejiang/01/2010(H3N2)(简称ZJ2010)的PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M和NS 8个基因片段,并分别克隆至双向表达载体p BD上。采用8质粒系统共转染293T细胞,转染48 h后加入TPCK胰酶作用2 h,将上清和细胞一同接种9~11日龄SPF鸡胚,并检测血凝效价。结果显示,本研究成功拯救获得了病毒株r ZJ2010。r ZJ2010株的8个基因片段的序列均与亲本ZJ2010株的序列相同。r ZJ2010株与ZJ2010株在鼠的肺和鼻中复制水平接近。这些结果证实,本研究已成功建立H3N2亚型犬流感病毒反向株遗传操作系统,为该病毒的致病机理、传播机制以及跨宿主传播机制研究等奠定了技术平台。