嗜线虫致病杆菌血腔毒素Tp40的纯化和特性分析

编号 zgly0000599994

文献类型 期刊论文

文献题名 嗜线虫致病杆菌血腔毒素Tp40的纯化和特性分析

作者 杨君  王勤英  宋萍  南宫自艳  崔龙  孔繁芳  冯姗姗 

作者单位 河北农业大学植物保护学院  河北农业大学林学院 

母体文献 微生物学报 

年卷期 2008,48(5)

页码 677-683

年份 2008 

分类号 Q935 

关键词 嗜线虫致病杆菌  血腔毒素  大蜡螟  基因克隆  序列分析 

文摘内容 【目的】嗜线虫致病杆菌是一种昆虫病原线虫共生菌，它能够产生多种杀虫毒素。本研究旨在从嗜线虫致病杆菌Xenorhabdus nematophila HB310菌株的细胞内纯化新的杀虫蛋白毒素，并对其进行基因克隆和序列分析。【方法】应用盐析和制备型非变性凝胶电泳等方法纯化蛋白，再通过对5龄大蜡螟幼虫血腔注射进行活性筛选。对获得的目的蛋白与已知蛋白进行同源分析，克隆出该目的蛋白的基因序列，从而进行相应的基因和氨基酸序列分析。【结果】本研究纯化的Tp40蛋白对大蜡螟LD50为68．54ng／头，其SDS-PAGE电泳图谱只显示出一条分子量约为42kDa的多肽。Western印迹分析表明Tp40与已知的Txp40为同源蛋白，并且仅存在于细胞内。编码该蛋白的基因开放读码框全长1107bp(GenBank登录号：EU095326)，编码368个氨基酸残基，预测分子量为41．5kDa，等电点为8．66，与GenBank中的其余13株昆虫病原线虫共生菌所包含的相似基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列比较，同源性分别为85％～99％和70％～99％。【结论】Tp40蛋白具有很高的血腔杀虫活性，其基因序列具有较强的保守性，是昆虫病原线虫共生菌复合体杀虫过程中的一种关键因子。