长春花ISSR-PCR反应体系的正交优化

编号 zgly0000643291

文献类型 期刊论文

文献题名 长春花ISSR-PCR反应体系的正交优化

作者 刘峰  顾志敏  陈析丰  金杨  马伯军 

作者单位 浙江师范大学化学与生命科学学院 

母体文献 安徽农业科学 

年卷期 2010(5)

页码 2261-2263,2267

年份 2010 

分类号 S685.99 

关键词 长春花  ISSR-PCR  正交设计  引物筛选 

文摘内容 [目的]筛选最适的长春花ISSR-PCR反应体系。[方法]采用正交试验方法,对影响长春花ISSR-PCR反应体系的引物浓度、dNTP浓度、Mg2＋浓度、TaqDNA聚合酶浓度和模板DNA浓度5个因素在4个水平上进行正交试验,建立适合长春花ISSR-PCR的反应体系。[结果]长春花ISSR-PCR反应体系的最佳条件：引物浓度0.50μmol/L,dNTP浓度0.10 mmol/L,Mg2＋浓度3.00 mmol/L,Taq酶浓度0.75U/25μl,DNA模板浓度350 ng/25μl。采用该反应体系筛选出12对适合于长春花ISSR-PCR反应的引物。[结论]利用优化系统进行长春花的ISSR-PCR反应,可获得稳定性高、重复性好、背景清晰的电泳结果。