两种向日葵检疫性真菌病害的多重DPO-PCR检测方法

编号 zgly0001485388

文献类型 期刊论文

文献题名 两种向日葵检疫性真菌病害的多重DPO-PCR检测方法

作者 张娜  乾义柯  魏霜  梁巧玲  鄞杰平  刘中勇  陈卫民 

作者单位 伊犁师范学院  伊犁出入境检验检疫局  汕头出入境检验检疫局  伊犁职业技术学院 

母体文献 植物检疫 

年卷期 2015年06期

年份 2015 

分类号 S435.655 

关键词 向日葵白锈病菌  向日葵黑茎病菌  多重DPO-PCR  检测 

文摘内容 本研究根据向日葵白锈病菌大亚基核糖体RNA基因序列,向日葵黑茎病菌的ITS-5.8S r RNA基因序列,分别设计特异性DPO(dual priming oligonucleotide)引物,建立同时检测这两种检疫性病菌的多重DPO-PCR检测方法,并对其特异性和灵敏度进行评价。结果表明,所设计的DPO引物特异性强,仅向日葵白锈病菌和向日葵黑茎病菌可分别扩增出307 bp与388 bp的特异性条带,其他参照菌株及阴性对照均无条带;检测体系对混合模板中向日葵白锈病菌和向日葵黑茎病菌的DNA灵敏度均达0.05 ng/μL;且该检测方法对退火温度不敏感,适用范围广。该方法能够准确、快速的检测向日葵白锈病菌和向日葵黑茎病菌,适合于口岸实验室的快速检测。