真菌病毒FpgMBV1中P3基因的原核表达及多克隆抗体的制备

编号 zgly0001719780

文献类型 期刊论文

文献题名 真菌病毒FpgMBV1中P3基因的原核表达及多克隆抗体的制备

作者 李轲  刘东伟  王志芳  谢源  张晓婷  李洪连 

作者单位 河南农业大学植物保护学院 

母体文献 植物病理学报 

年卷期 2020年05期

年份 2020 

分类号 S432.4 

关键词 假禾谷镰孢菌巨型双链RNA病毒1  P3蛋白  原核表达  多克隆抗体 

文摘内容 采用RT-PCR法从假禾谷镰孢菌（Fusarium pseudograminearum）弱毒菌株FC136-2A的菌丝中扩增出假禾谷镰孢菌巨型双链RNA病毒1（Fusarium pseudograminearum megabirnavirus 1,FpgMBV1）的P3蛋白编码序列。测序结果显示,FpgMBV1-P3蛋白的编码序列长2 700 bp,编码901个氨基酸残基。构建原核表达载体pET28a-FpgMBV1-P3并转化大肠杆菌BL21（DE3）菌株,在25℃以0.5 mmol·L-1 IPTG诱导表达重组蛋白。SDS-PAGE分析表明,重组蛋白分子量约为90 kDa,与预期分子量大小相符。将该重组蛋白作为抗原免疫日本大耳白兔,获得抗血清,采用间接ELISA测定其效价达1∶128 000,能够特异性检测到假禾谷镰孢菌菌丝中的FpgMBV1-P3蛋白。研究结果可为探究FpgMBV1-P3的结构和功能,以及进一步探讨FpgMBV1在假禾谷镰孢菌弱毒菌株FC136-2A中的作用机制奠定基础。