小鼠胚胎干细胞成纤维细胞液养层的制备

编号 zgly0001628155

文献类型 期刊论文

文献题名 小鼠胚胎干细胞成纤维细胞液养层的制备

作者 刘发央  王志勇 

作者单位 甘肃农业大学草业学院  河南信阳农业专科学校园林系甘肃兰州730070  河南信阳464000 

母体文献 草原与草坪 

年卷期 2005年02期

年份 2005 

分类号 Q813.11 

关键词 小鼠  胚胎  MEF  丝裂霉素C  胚胎干细胞 

文摘内容 采用受孕12.5 d、13.5 d、14.5 d的ICR品系小鼠的胚胎制备原代成纤维细胞,在相同条件下观察不同胚龄胚胎成纤维细胞的增殖情况。结果表明受孕13.5 d胚胎为分离小鼠胚胎原代成纤维细胞的最适胚龄。分离出的原代成纤维细胞在37 ℃时,用0.25%胰蛋白酶0.02%EDTA消化组织的时间为3 min,可在培养3 d后传代。F1代和F2代较F3代成纤维细胞分泌的抑制干细胞分化因子LIF的量要多。小鼠胚胎成纤维细胞冻存于-135 ℃~-150 ℃10 个月,复苏后能正常传代。丝裂霉素C抑制胚胎成纤维细胞增殖的最适浓度为10μg/105细胞,作用时间为2.5 h,丝裂霉素C处理过的胚胎成纤维细胞可以在12 d内即不增殖也不死亡,但在6 d内使用效果最佳。