海南坡鹿CDC42 cDNA的克隆、原核表达及纯化

编号 zgly0000761284

文献类型 期刊论文

文献题名 海南坡鹿CDC42 cDNA的克隆、原核表达及纯化

作者 张巍  陈品林  雷明  成鹰  陈欢  曹献英  杜丽  张冬琳  刘涛  许世英  符运南  祁超  王凤阳 

作者单位 海南大学农学院  华中师范大学生命科学学院 

母体文献 兽类学报 

年卷期 2011,31(1)

页码 97-102

年份 2011 

分类号 Q786 

关键词 海南坡鹿  CDC42  克隆  原核表达  纯化 

文摘内容 应用RT-PCR方法对海南坡鹿细胞分裂周期蛋白42(Cell division cycle 42,CDC42)编码区进行扩增,将扩增产物与PET-42a载体连接,重组质粒鉴定正确后,进行生物信息学分析;构建pET42a-hdCDC42表达载体,经IPTG诱导表达,将表达产物进行SDS-PAGE、可溶性分析、纯化及Western blot分析。结果表明,海南坡鹿CDC42含有1个576 bp的开放阅读框,编码191个氨基酸。经IPTG诱导表达后,得到一个带有His-tag和GST的约54 kD的融合蛋白,用抗His单克隆抗体进行Western blot,得到一条约54 kD的特异性抗体结合带,表明海南坡鹿CDC42原核表达载体成功构建并表达。