编号
zgly0001383296
文献类型
期刊论文
文献题名
鲤春病毒血症病毒糖蛋白的高效表达和纯化
作者单位
深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心深圳市外来有害生物检测技术研发重点实验室
母体文献
中国动物传染病学报
年卷期
2010年02期
年份
2010
分类号
S941
关键词
糖蛋白
表达
鲤春病毒血症病毒
文摘内容
本研究从鲤春病毒血症病毒(Spring viremia of carp virus,SVCV)SVCV-741毒株克隆鲤春病毒血症病毒糖蛋白基因(svc-g),将svc-g亚克隆到原核表达载体pET-28a,转化大肠杆菌E.coliBL-21(DE3)后,用IPTG诱导培养,获得菌体总蛋白。用SVCV毒株免疫山羊所得到的抗血清作为一抗进行免疫印迹实验,结果在硝酸纤维素滤膜上检测到50~71 kDa之间的特异性免疫条带,与SVCV糖蛋白预测分子量一致,研究证明了工程菌表达获得的重组蛋白具有与SVCV毒株相同的免疫原性,也证明了该蛋白的糖基化对其免疫表位是非必需的。本研究进一步通过发酵基因工程菌和蛋白质纯化过程,获得大量的鲤春病毒血症病毒糖蛋白,为后期免疫动物获得抗血清储备了原料,也为SVCV的免疫学检测方法的建立奠定了物质基础。