编号
zgly0001469968
文献类型
期刊论文
文献题名
鲤春病毒血症病毒糖蛋白在杆状病毒表达系统中的表达与鉴定
作者
刘红
郑晓聪
于力
王津津
贾鹏
何俊强
史秀杰
兰文升
叶奕优
刘荭
吴志新
作者单位
华中农业大学水产学院
深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心
母体文献
中国动物检疫
年卷期
2014年06期
年份
2014
分类号
S941.416
关键词
鲤春病毒血症病毒
糖蛋白
杆状病毒表达
文摘内容
本实验利用杆状病毒表达系统表达鲤春病毒血症病毒(SVCV)糖蛋白。将SVCV糖蛋白基因(G)插入到供体质粒pFastBacHTA中,再用构建的质粒pFastBac-G转化E.coli DH10αBac感受态细胞,经蓝白斑筛选,获得含G基因的重组穿梭载体Bacmid-G。通过脂质体介导将Bacmid-G转染对数生长期的Sf9细胞,获得重组杆状病毒AcNPV-G。AcNPV-G感染Sf9细胞,超声破碎后离心取上清进行SDS-PAGE及Western Blot试验,结果可见大小约为57 kDa的蛋白条带,并与羊抗SVCV血清发生特异性反应。间接免疫荧光试验在感染AcNPV-G的Sf9细胞中观察到荧光信号。试验结果表明,AcNPV-G在Sf9细胞中成功的表达了SVCV糖蛋白,且具有良好的免疫学活性。