粉尘螨Ⅰ类变应原(Der fⅠ)的克隆表达、纯化及免疫学特性

编号 zgly0000471986

文献类型 期刊论文

文献题名 粉尘螨Ⅰ类变应原(Der fⅠ)的克隆表达、纯化及免疫学特性

学科分类 220.3020;森林昆虫学

作者 朱健琦  刘志刚  高波  吉坤美  邢苗 

作者单位 深圳大学生命科学学院  深圳市微生物基因工程重点实验室 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2006,49(2)

页码 213-218

年份 2006 

分类号 Q966 

关键词 粉尘螨  变应原  表达  纯化  特性鉴定 

文摘内容 粉尘螨Ⅰ类变应原(DerfⅠ)是粉尘螨Dermatophagoides farinae主要变应原, 可引发Ⅰ型变态反应。挑取纯培养的粉尘螨, 提取总RNA, 采用RT-PCR方法有效地扩增出DerfⅠ片段, 产物连接入T载体(pMDl8)。经扩增后, 用NdeⅠ和XhoⅠ双酶切后将目的片段连接到pET24a表达载体上, 得到重组质粒pET24a-Der fⅠ, 工程菌经IPTG诱导培养, 高效表达出Der fⅠ蛋白, 该蛋白主要以包涵体形式存在。表达产物经亲和层析纯化, 用Western blot及ELISA方法检测免疫学活性, 结果表明目的蛋白具有良好的免疫原性。