Hela细胞早孕因子基因的克隆与原核表达

编号 zgly0001487658

文献类型 期刊论文

文献题名 Hela细胞早孕因子基因的克隆与原核表达

作者 郑玮璐  刘为民  陈芳  王丙云  梁梓森  计慧琴  谢莹佳 

作者单位 佛山科学技术学院  华南农业大学 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2015年05期

年份 2015 

分类号 S857.2 

关键词 早孕因子  表达  纯化  特性鉴定 

文摘内容 为了获取大量具有免疫原性的早孕因子(EPF)重组蛋白,通过PCR技术扩增得到Hela细胞EPF基因片段,与pREST-A连接。将质粒pREST-A-EPF转化大肠埃希菌BL21后IPTG进行诱导表达,采用His标签蛋白纯化试剂盒纯化重组蛋白后,再用SDS-PAGE和Western blot分别鉴定其纯度和特异性。结果表明,EPF cDNA以正确的阅读框架插入表达载体pREST-A,经IPTG诱导后高效表达EPF重组蛋白,Western blot表明其与抗EPF抗体特异性结合。论文构建了EPF的原核表达载体,纯化获得了重组蛋白,为进一步开展EPF蛋白的相关研究和猪早孕诊断试剂盒的开发奠定了基础。