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柑橘4种病毒多重PCR检测技术的建立及应用



编号 zgly0001677804

文献类型 期刊论文

文献题名 柑橘4种病毒多重PCR检测技术的建立及应用

作者 黄爱军  王莹  丁敏  卢占军  易龙 

作者单位 赣南师范大学生命科学学院国家脐橙工程技术研究中心 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2019年08期

年份 2019 

分类号 S436.66 

关键词 柑橘  柑橘衰退病毒  柑橘碎叶病毒  柑橘黄化脉明病毒  柑橘叶斑驳病毒  多重PCR 

文摘内容 柑橘衰退病毒(CTV)、柑橘碎叶病毒(CTLV)、柑橘黄化脉明病毒(CYVCV)和柑橘叶斑驳病毒(CLBV)是影响柑橘生产的重要病毒性病害,建立快速、准确的检测方法是防控该病害的基础。本研究通过筛选针对4种病毒基因组保守区域设计的特异性引物,优化影响多重RT-PCR扩增的引物浓度、退火温度,建立了可同时扩增4种病毒的多重RT-PCR检测体系。该检测体系扩增的特异片段大小分别是CTLV 889 bp、CYVCV 612 bp、CTV 462 bp和CLBV 294 bp,扩增产物清晰,特异,检测灵敏度较普通单重RT-PCR灵敏度低约10倍。采用多重RT-PCR和单重RT-PCR对收集到的59份田间样品分别进行检测,结果显示2种方法检测结果一致,4种病毒的检出率在11.9%~54.2%之间。建立的多重RT-PCR方法可准确、快速、灵敏地检测单一或复合侵染的4种柑橘病毒。

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