红肉猕猴桃DFR基因的克隆及表达分析

编号 zgly0001392379

文献类型 期刊论文

文献题名 红肉猕猴桃DFR基因的克隆及表达分析

作者 杨俊  姜正旺  王彦昌 

作者单位 中国科学院武汉植物园保育遗传重点实验室  中国科学院研究生院 

母体文献 武汉植物学研究 

年卷期 2010年06期

年份 2010 

分类号 S663.4 

关键词 猕猴桃  二氢黄酮醇-4-还原酶基因  电子克隆  花青素  表达 

文摘内容 利用葡萄(Vitis vinifera)果实的DFR-cDNA序列搜索猕猴桃(Actinidia Lindl.)EST数据库,拼接所有与该cDNA相似片段成contig并借此设计引物,分离出红肉猕猴桃(A.chinensis var.rufopulpa)中DFR的两个克隆(AcDFR1和AcDFR2)的片段。在此基础上利用5′RACE和3′RACE技术,分别克隆到具有完整阅读框的AcDFR1(1264 bp)和靠近3′端的部分AcDFR2序列(880 bp)。AcDFR1与茶DFR-cDNA(Camellia sinensis)相似达84%,且AcDFR1与非洲菊变种(Gerbera hybrida var.regina)的氨基酸序列相似达80%。据DFR聚类分析,AcDFR1与AcDFR2蛋白类型上差异显著。实时定量PCR分析表明,AcDFR1在‘金魁’(A.chinensis var.deliciosa‘Jinkui’)中表达很高,AcDFR1和AcDFR2在‘金农’(A.chinensis var.chinensis‘Jinnong’)与‘红阳’(A.chinensis var.chinensis‘Hongyang’)中较低,且在果实发育后期(大约花后90～120 d)均有所升高,二者可能参与了红肉猕猴桃中花青素的积累,而在绿肉猕猴桃‘金魁’与黄肉猕猴桃‘金农’中,AcDFR1可能还参与了类黄酮代谢过程中的上游分支途径。