单抗I-ELISA和TAS-ELISA检测百合无症病毒的研究

编号 zgly0001315990

文献类型 期刊论文

文献题名 单抗I-ELISA和TAS-ELISA检测百合无症病毒的研究

作者 刘成科  吴建祥  洪健  周雪平  叶美琴 

作者单位 浙江大学生物技术研究所  浙江省丽水市农业局 杭州310029  杭州310029  丽水323000 

母体文献 植物病理学报 

年卷期 2006年04期

年份 2006 

分类号 S436.8 

关键词 百合无症病毒  I-ELISA  TAS-ELISA  DAS-ELISA 

文摘内容 以抗百合无症病毒(Lily symptom less virus,LSV)的单克隆抗体为核心,建立了间接ELISA(I-ELISA)和三抗体夹心ELISA(TAS-ELISA)的检测方法。I-ELISA检测体系中,病叶汁液和单克隆抗体腹水的工作浓度分别为1∶20和1∶6 000,对病叶汁液的检测灵敏度达到了1∶2 560,可检测到提纯病毒绝对量为1.35 ng。TAS-ELISA检测体系中捕获抗体和单克隆抗体腹水的工作浓度分别为1∶200和1∶6 000,检测病叶汁液的灵敏度达到了1∶5 120,对于提纯病毒可检测到0.68 ng。使用美国Agd ia公司双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测试剂盒对病叶汁液的检测灵敏度为1∶2 560,提纯病毒检出量1.35 ng。用3种ELISA方法检测了采自浙江省丽水市的46个田间样品,I-ELISA、TAS-ELISA和DAS-ELISA测出的阳性样品数分别为19、21和18个,阳性率为41%、46%和39%。灵敏度检测和田间样品检测结果显示,TAS-ELISA的灵敏度高于DAS-ELISA和I-ELISA。相同样品I-ELISA所测出的OD405值和P/N值普遍高于DAS-ELISA,表明LSV单抗比多抗具有更强的特异性和更高的灵敏度。