4×35s增强子的克隆及其功能验证

编号 zgly0000474769

文献类型 期刊论文

文献题名 4×35s增强子的克隆及其功能验证

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 陈俊  杨之帆  张文隽 

作者单位 武汉科技大学化学资源环境学院  武汉大学生命科学学院 

母体文献 华中科技大学学报: 自然科学版 

年卷期 2006,34(2)

页码 118-121

年份 2006 

分类号 Q943 

关键词 4×35s增强子  绿色荧光蛋白基因  裂殖酵母  过表达突变载体 

文摘内容 用PCR扩增法获得含4×35s增强子的DNA片段, 酶切后克隆到质粒pREP—GFP中, 得到4×35s增强子插入方向相反的两种表达质粒pREPenl和pREPen2。并进行了测序确认。这两种表达质粒和pREP—GFP同时转化亮氨酸缺陷型裂殖酵母。荧光显微镜观察表明, pREP—GFPen1和pREP—GFPen2转化的酵母细胞, 比pREP—GFP转化的酵母细胞所发的绿色荧光强8～10倍, 体积大2～5倍。使用流式细胞仪和Lowry方法分别测定三种细胞平均荧光强度和蛋白量。测量结果表明: 2×10‘细胞的平均荧光强度分别为1800U, 1800U和200U; 2×10^4细胞的GFP含量分别为200μg, 200μg和25μg.这一结果证明4×35s增强子增强了gfp gene的表达水平, 所克隆的4×35s增强子具有正常的功能。