西洋杜鹃ISSR-PCR反应体系的建立及优化

编号 zgly0000735853

文献类型 期刊论文

文献题名 西洋杜鹃ISSR-PCR反应体系的建立及优化

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 郑宇  何天友  陈凌艳  陈礼光  荣俊冬  郑郁善 

作者单位 福建农林大学园林学院  闽江学院地理科学系 

母体文献 福建林学院学报 

年卷期 2011,31(2)

页码 126-130

年份 2011 

分类号 S685.21 

关键词 西洋杜鹃  简单序列重复区间  反应体系  优化 

文摘内容 以西洋杜鹃(Rhododendron hybridum)叶片提取的基因组DNA为材料,用引物UBC880(序列为GGA GAG GAG AGGAGA)研究了PCR反应体系的主要成分及退火温度对该种植物ISSR扩增结果的影响。确立了可用于西洋杜鹃ISSR-PCR分析的最适宜的PCR反应体系: 20μL PCR反应体积中,含10 ng模板DNA,0.25 mmol.L-1 dNTPs,2.0 mmol.L-1 Mg2+,1.0U Taq DNA聚合酶,0.4μmol.L-1引物,并确定引物UBC 880的最适退火温度为54.4℃。PCR扩增程序: 94℃预变性5 min,94℃变性45 s,54.4℃退火45 s,72℃延伸1.5 min,共40个循环后,72℃延伸7 min,4℃保存。应用该ISSR体系对11份西洋杜鹃种质进行了扩增,证实了该体系的适用性和稳定性。