白灵侧耳漆酶分离纯化及其酶学性质研究

编号 zgly0001497124

文献类型 期刊论文

文献题名 白灵侧耳漆酶分离纯化及其酶学性质研究

作者 杨娟  邹亚杰  张瑞颖  胡清秀 

作者单位 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所 

母体文献 菌物学报 

年卷期 2015年03期

年份 2015 

分类号 Q946.5 

关键词 白灵侧耳  漆酶  分离纯化  酶活 

文摘内容 为了探索白灵侧耳Pleurotus eryngii var.tuoliensis漆酶性质,以白灵侧耳菌株00485为试验材料,从发酵液中分离纯化得到胞外漆酶并对其酶学性质进行测定。纯化流程依次为DEAE-Cellulose阴离子交换层析,CM-Cellulose阳离子交换层析,SP-Sepharose强阳离子交换层析以及Superdex 75凝胶过滤层析,获得胞外白灵侧耳漆酶(Pn Lac)。SDS-PAGE检测结果表明Pn Lac为65k Da的单一蛋白。Pn Lac经过胰蛋白酶水解得到3种肽段,经过NBCI-BLAST后发现它们与糙皮侧耳、环柄韧伞、刺芹侧耳等的漆酶具有同源性。底物为2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)时该种漆酶的最适反应温度和p H分别为50℃和3.0,Ca2+和Hg2+能够抑制它的活性,相反地Cu2+和Mn2+能够提高它的活性,米氏常数Km和Vmax分别是0.17mmol/L和1.76OD/min/U。