O型口蹄疫病毒VP1基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立

编号 zgly0001400476

文献类型 期刊论文

文献题名 O型口蹄疫病毒VP1基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立

作者 王云龙  孙强  昌静峰  李玉林  王国强  董彩文  刘旺根  梁晓艳  孙新城 

作者单位 河南师范大学生命科学学院  郑州职业技术学院  河南省生物工程技术研究中心 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2011年05期

年份 2011 

分类号 S855.3 

关键词 口蹄疫病毒  VP1基因  原核表达  间接ELISA 

文摘内容 表达O型口蹄疫病毒VP1蛋白,用于O型口蹄疫病毒的检测。以质粒T234/FMDV为模板,PCR扩增VP1基因片段,构建重组质粒pET-41b/VP1,转化表达菌BL21(DE3),IPTG诱导,SDS-PAGE凝胶电泳和Western blot进行分析检测,目的蛋白经镍离子亲和层析纯化,以纯化的目的蛋白包被,建立了间接VP1-ELISA检测方法。VP1基因表达的蛋白主要以包涵体形式存在,复性后具有免疫反应性,方阵滴定法确定了包被抗原的最佳工作浓度(1 mg/L),最佳的酶结合稀释度为1∶8 000,检测结果特异性好。O型口蹄疫病毒VP1基因可在表达载体pET-41b中表达,并建立了O型口蹄疫病毒检测方法。