紫花苜蓿MsWRKY33转录因子的分离及遗传转化研究

编号 zgly0001624656

文献类型 期刊论文

文献题名 紫花苜蓿MsWRKY33转录因子的分离及遗传转化研究

作者 冯光燕  王学敏  付媛媛  方志红  高洪文  张新全 

作者单位 四川农业大学草业科学系  中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 

母体文献 草业学报 

年卷期 2015年11期

年份 2015 

分类号 S541.9 

关键词 紫花苜蓿  MsWRKY33  转录因子  遗传转化 

文摘内容 WRKY转录因子是植物特有的转录因子,广泛参与植物对多种逆境胁迫的反应。但是对紫花苜蓿中WRKY转录因子的研究还较少。本研究从紫花苜蓿中克隆了一个WRKY I类转录因子MsWRKY33。该基因CDS全长1536bp,编码512个氨基酸,结构分析显示MsWRKY33包括两个WRKY结构域和一个C2H2锌指结构(C-X4-CX23-H-X-H),表明其属于WRKY I族WRKY转录因子。亚细胞定位预测MsWRKY33蛋白定位在细胞核。MsWRKY33基因受盐、干旱和冷胁迫诱导,暗示基因可能参与了这些逆境胁迫的调控。构建原核表达载体pETMsWRKY33,SDS-PAGE分析表明在大肠杆菌中表达了MsWRKY33蛋白。扩增MsWRKY33编码区cDNA,以pBI121为基础载体,构建植物超表达载体pBI121-MsWRKY33。采用农杆菌介导的愈伤组织培养法转化紫花苜蓿。利用nptⅡ基因引物和载体特异引物检测抗性苗呈阳性,表明目的基因已成功导入紫花苜蓿基因组中。qRT-PCR检测发现,MsWRKY33基因在转基因株系中得到增强表达。本研究为进一步探索WRKY转录因子基因在紫花苜蓿抗逆性调控中的作用奠定了基础。