鸡传染性法氏囊病病毒BJ-10株VP2基因的克隆及原核表达

编号 zgly0000823644

文献类型 期刊论文

文献题名 鸡传染性法氏囊病病毒BJ-10株VP2基因的克隆及原核表达

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 王俊全  王韦华 

作者单位 渭南职业技术学院 

母体文献 西北农林科技大学学报: 自然科学版 

年卷期 2013(9)

页码 38-42

年份 2013 

分类号 S852.659.4 

关键词 鸡传染性法氏囊病病毒  VP2基因  基因克隆  原核表达载体 

文摘内容 【目的】:克隆鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)BJ10株卯2基因, 构建其原核表达载体, 并在大肠埃希菌中进行高效表达。【方法】:根据IBDVVP2基因序列设计l对特异性引物, 应用RTPCR技术克隆IBDVBJ-10株卯2基因; 将目的基因插入pMDl8-T连接载体, 筛选出阳性重组质粒; 将该质粒克隆至原核表达载体pET-32n中。转化入JMl09, 经IPTG诱导表达, 对产物进行SDS-PAGE电泳分析, 确定IPTG的最佳诱导表达时间和浓度。【结果】:克隆到r全长1356bp的IBDVBJ-10株VP2基因; PCR、酶切鉴定分析表明, 成功构建了重组质粒pET32a—VP2; SD争PA(jE电泳分析表明, 在宿主菌JMl09中成功表达了约为60ku的VP2蛋白; IPTG诱导表达时间以4.5h为宜, 诱导最佳浓度为0.8mmol/L。【结论】:成功克隆了IBDVBJ-10株VP2基因, 并在大肠埃希菌中表达了VP2蛋白。