用抑制差减杂交法分离和克隆梭梭幼苗受渗透胁迫诱导相关基因的cDNA片段

编号 zgly0000248071

文献类型 期刊论文

文献题名 用抑制差减杂交法分离和克隆梭梭幼苗受渗透胁迫诱导相关基因的cDNA片段

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 郭新红  姜孝成 

作者单位 湖南师范大学生命科学学院 

母体文献 植物生理学报 

年卷期 2001,27(5)

页码 401-406

年份 2001 

分类号 Q943  Q945.78 

关键词 抑制差减杂交  梭梭幼苗  渗透胁迫  cDNA文库  特异表达 

文摘内容 以Hoagland溶液培养的梭梭幼苗（H）为对照群体，甘露醇处理的梭梭幼苗（M）为目标群体，进行抑制差减杂交。用经过H cDNA差减的M cDNA构建了一个含有大约400个独立克隆的差减文库；采用差减前的H cDNA和M cDNA以及正向／反向差减杂交后的cDNA为模板标记探针，对随机挑取的100个重组质粒进行差示筛选，获得了21个阳性侯克隆，从这些阳性候选克隆中随机挑取了8个进行Northern blot分析。证实其中3个候选克隆代表了在M中特异表达或表达增强的基因，序列分析和同源性比较表明它们与逆境胁迫有关；而另外5个候选克隆无Northern杂交信号，推测它们为低丰度转录本。