密码子优化的甲型H1N1流感病毒HA/HA1基因真核载体的构建及初步表达

编号 zgly0001376435

文献类型 期刊论文

文献题名 密码子优化的甲型H1N1流感病毒HA/HA1基因真核载体的构建及初步表达

作者 李捧花  张晓光  王晶钰  马晶  张晓梅 

作者单位 西北农林科技大学动物医学院  中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肿瘤病毒室 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2010年11期

年份 2010 

分类号 R373.1 

关键词 流感病毒  HA基因  HA1基因  密码子优化  真核表达 

文摘内容 【目的】构建甲型流感病毒H1N1血凝素基因HA/HA1的真核表达载体,并检测其在BHK-21细胞中的表达。【方法】按照人的偏爱密码子,对H1N1流感病毒的HA/HA1基因进行优化改造,以提高其表达量,经全基因合成后插入到真核表达载体pSNAV中,构建了真核表达质粒pSNAV-Mod. HA与pSNAV-Mod. HA1;质粒转染BHK-21细胞,G418筛选后,用免疫荧光及Western blot技术检测其表达情况。【结果】成功构建了血凝素基因HA/HA1的真核表达载体。经G418筛选得到单克隆,免疫荧光技术和Western blot检测10代,显示Mod. HA和Mod. HA1皆可在BHK-21细胞中稳定表达。【结论】成功构建的流感病毒HA和HA1真核表达载体,可为今后开展多基因表达的基因工程疫苗及H1N1检测试剂奠定基础。