重组辛德毕斯病毒E基因痘苗病毒的构建

编号 zgly0001400795

文献类型 期刊论文

文献题名 重组辛德毕斯病毒E基因痘苗病毒的构建

作者 刘振江  刘昊  刘燕瑜  郭欢欢  凡敏  岳云强  陆飞  秦艳青  李国江  鲁会军  金宁一 

作者单位 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所  吉林农业大学动物科技学院  吉林大学畜牧兽医学院  吉林农业科技学院 

母体文献 中国动物传染病学报 

年卷期 2011年06期

年份 2011 

分类号 S852.659.6 

关键词 辛德毕斯病毒  转移载体  绿色荧光蛋白  重组痘苗病毒 

文摘内容 为了构建表达辛德毕斯病毒E基因的重组痘苗病毒,本研究通过基因重组的方法将辛德毕斯病毒E基因及绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因分别连接至痘苗病毒转移载体pSTK,酶切鉴定得到阳性重组质粒pSTK-SINE-EGFP。采用脂质体转染的方法,将该重组质粒与痘苗病毒天坛株共转染BHK-21细胞,通过同源重组获得重组痘苗病毒。利用EGFP筛选阳性重组痘苗病毒vTTVV-SINE-EGFP,收集感染重组痘苗病毒的BHK-21细胞,SDS-PAGE电泳检测辛德毕斯病毒E基因在细胞中的表达情况,Western blot分析表达产物的免疫原性。结果证明辛德毕斯病毒E基因能在重组痘苗病毒vTTVV-SINE-EGFP中获得表达,且表达产物具有良好的免疫原性。表达辛德毕斯病毒E基因的重组痘苗病毒的成功构建,为研制辛德毕斯病毒活载体疫苗奠定了基础。