人脂联素原核表达纯化及活性检测

编号 zgly0001400554

文献类型 期刊论文

文献题名 人脂联素原核表达纯化及活性检测

作者 王云龙  李永超  昌静峰  李玉林  王国强  邓黎黎  陈冬焕  董彩文  孙新城  刘旺根  梁晓艳 

作者单位 河南工业大学  郑州职业技术学院  河南省生物工程技术研究中心 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2011年10期

年份 2011 

分类号 R346 

关键词 人脂联素  原核表达  免疫活性 

文摘内容 为了克隆人脂联素基因(ACRP30),获得有免疫活性的重组人脂联素,以人皮下脂肪组织为材料,提取总RNA,通过RT-PCR得到ACRP30基因。构建重组质粒pET-CKS-ACRP30,转化表达菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达人脂联素重组蛋白,利用镍亲和层析纯化,Western blot鉴定其活性,双抗体夹心法检测其免疫活性。获得了人脂联素基因,表达纯化了人脂联素融合蛋白,融合蛋白分子质量约为50ku,表达量约占菌体总蛋白的30%,纯度达到90%,双抗体夹心法检测重组蛋白具有免疫活性。本研究成功表达了人脂联素重组蛋白且表达产物具有免疫活性,为人脂联素检测技术的建立奠定了基础。