亮叶蜡梅ISSR反应体系的建立与优化

编号 zgly0000693728

文献类型 期刊论文

文献题名 亮叶蜡梅ISSR反应体系的建立与优化

作者 周明芹  阮锐  陈龙清 

作者单位 长江大学园艺园林学院  华中农业大学园艺林学学院 

母体文献 华中农业大学学报 

年卷期 2011,30(2)

页码 167-170

年份 2011 

分类号 S685.99 

关键词 亮叶蜡梅  PCR条件  ISSR反应体系 

文摘内容 为了建立和优化亮叶蜡梅(Chi monanthus nitens Oliv.)的ISSR反应体系,对模板DNA的浓度、引物浓度、Mg2+浓度等影响因子进行了筛选。结果表明: 在25μL的反应体系中,含有40 ng模板DNA、1 UTaq酶、0.2 mmol/L dNTP、0.3μmol/L引物、1.5 mmol/L Mg2+、2.5μL 10×buffer的扩增效果最好。利用该优化的反应体系,筛选出了12条稳定性强、清晰度高、多态性高的ISSR引物,并对筛选出的12条引物在不同退火温度(51-56℃)下的扩增效果进行了比较,从而确定了每个引物的最佳退火温度。