发根农杆菌介导西瓜转基因过表达体系的建立

编号 zgly0001688726

文献类型 期刊论文

文献题名 发根农杆菌介导西瓜转基因过表达体系的建立

作者 王平勇  徐永阳  赵光伟  贺玉花  孔维虎  张健  刘水苗  户克云  侯冲  王兰菊  徐志红 

作者单位 中国农业科学院郑州果树研究所  河南农业大学园艺学院 

母体文献 果树学报 

年卷期 2019年12期

年份 2019 

分类号 S651 

关键词 西瓜  发根农杆菌  K599  过表达 

文摘内容 【目的】建立发根农杆菌介导的西瓜转基因不定根过表达体系。【方法】探索利用野生型发根农杆菌K599侵染西瓜材料’Sugar Baby’,诱导西瓜产生不定根的实验方法。借助该方法,将含有GUS基因和EGFP基因的过表达载体pCAMBIA3301和pCAMBIA1300-ProSuper导入发根农杆菌K599,侵染西瓜材料’Sugar Baby’,通过常规PCR、qRTPCR、GUS染色和激光共聚焦显微镜检测,评价该过表达体系的效果。【结果】利用野生型和导入外源质粒的发根农杆菌均能成功诱导西瓜’Sugar Baby’产生不定根。PCR检测结果显示,携带pCAMBIA3301和pCAMBIA1300-ProSuper载体的发根农杆菌K599诱导产生的不定根阳性率达到100%。qRT-PCR、GUS染色和激光共聚焦显微镜检测均能成功检测到GUS基因和EGFP基因的过量表达。【结论】利用发根农杆菌K599诱导西瓜产生不定根介导基因过表达的方法,具有周期短,操作方便,转化率高的特点,可实现基因功能的快速验证,为西瓜根系相关基因的功能研究提供技术支持。