感染BBTV香蕉叶片cDNA文库的构建及评价

编号 zgly0001461408

文献类型 期刊论文

文献题名 感染BBTV香蕉叶片cDNA文库的构建及评价

作者 谭老喜  张雨良  周朋  章绍延  王健华  张秀春  刘志昕 

作者单位 中国热带农业科学院热带生物技术研究所  农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室  海南大学环境与植物保护学院 

母体文献 植物研究 

年卷期 2013年06期

年份 2013 

分类号 S668.1 

关键词 香蕉束顶病毒  香蕉叶片  酵母双杂交cDNA文库 

文摘内容 为了研究香蕉束顶病毒与香蕉寄主致病的互作分子机制,本文报道利用Make Your OwnMate&PlateTMLibrary System试剂盒成功构建感染BBTV香蕉叶片的cDNA文库。通过改良CTAB法提取感染BBTV香蕉叶片的总RNA,采用SMART法反转录合成双链cDNA,经SfiI酶切并去除短片段之后,与经同样酶切的pGADT7-SfiI载体连接,利用电转法将重组载体转化到大肠杆菌宿主细胞中,获得初级cDNA文库,最后以初级文库100万克隆为基数扩增,得到扩增文库并提取质粒。结果得到库容量大于2.0×106的初级文库,检测表明文库cDNA插入片段长度主要分布在700~2 000 bp,文库重组率为87.5%。结果表明,该文库质量较好,可用于后续酵母双杂交互作蛋白筛选试验,本研究为开展病毒与寄主互作的研究奠定基础。