春兰基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化

编号 zgly0000585005

文献类型 期刊论文

文献题名 春兰基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化

作者 单丽丽  陆瑞菊  王亦菲  陆惠丽  黄剑华 

作者单位 上海市农业科学院生物技术研究所  上海市农业遗传育种重点实验室 

母体文献 中国农学通报 

年卷期 2008,24(1)

页码 68-73

年份 2008 

分类号 S663.1 

关键词 春兰  R-APD  DNA  反应体系 

文摘内容 以春兰为研究材料，对春兰基因组DNA的提取以及RAPD-PCR反应体系进行了优化。结果表明，在提取液中加入PVP和β-巯基乙醇去除酚类物质，采用高盐沉淀DNA和多次洗涤去除糖类，可以得到高质量春兰基因组DNA。电泳检测表明，所获得的DNA完整，无降解，完全可以满足R-APD等分子标记分析的需要。同时对春兰RAPD-PCR反应体系中各个影响因素进行了优化，建立了适合春兰R-APD分子标记的最佳反应体系，即20μl反应体系中含1UTaqDNA聚合酶，60μmol／L dNTPs，2．25mmol／L Mg^2＋，1．0μmol／L引物，1．5ng／μl模板DNA。