甘草RAPD-PCR反应体系正交优化研究

编号 zgly0000755043

文献类型 期刊论文

文献题名 甘草RAPD-PCR反应体系正交优化研究

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 张增福  董建力  李明 

作者单位 宁夏农业技术推广总站  宁夏农林科学院农业生物技术研究中心 

母体文献 农业科学与技术: 英文版 

年卷期 2011,12(10)

页码 1427-1429

年份 2011 

分类号 S 

关键词 甘草  DNA  RAPD-PCR  反应体系  优化  正交试验 

文摘内容 [目的]建立一套适合甘草分子学研究的RAPD-PCR反应体系。[方法]以甘草种质为试材,采用正交试验法设计,对影响RAPD-PCR扩增的主要因素dNTPs、引物、Taq酶和DNA模板进行优化筛选。[结果]总体积25μl的甘草RAPD-PCR最佳反应体系为: 10×PCR缓冲液(含MgCl2)2.5μl,10mmol/LdNTPs2.5μl,50ng DNA2μl,10μmol/L引物2μl,5UTaq酶0.4μl。对引物的退火温度进行了梯度筛选,34℃时扩增效果较好。[结论]进行甘草RAPD-PCR反应体系的正交优化非常有效。