猕猴桃GalUR表达与抗坏血酸积累的关系

编号 zgly0000768844

文献类型 期刊论文

文献题名 猕猴桃GalUR表达与抗坏血酸积累的关系

学科分类 220.45;经济林学

作者 李明军  刘军  梁东  郭春苗  马锋旺 

作者单位 西北农林科技大学园艺学院 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2011,38(9)

页码 1641-1649

年份 2011 

分类号 S663.4 

关键词 猕猴桃  D-半乳糖醛酸还原酶  原核表达  Western杂交  维生素C 

文摘内容 通过RT-PCR从美味猕猴桃(Actinidia deliciosa)果实中克隆了D-半乳糖醛酸还原酶(GalUR)全长cDNA序列,并分析其序列特征,进行原核表达,制备特异抗体,分析其mRNA及蛋白表达水平与果实发育过程及不同组织中抗坏血酸(AsA)合成和积累的关系。结果表明: 克隆的GalURcDNA(GenBank登录号为GU339035)包含的最大开放阅读框(open reading frame,ORF)为990bp,编码329个氨基酸残基,预测分子量为37kD,与报道的草莓等其他植物GalUR具有较高的相似性。构建的pET-32a(+)-GalUR载体在大肠杆菌BL21(E.coliBL21)中异源表达后,获得了主要以包涵体存在约58kD的融合蛋白GalUR-His(His约21kD)。以该蛋白制备抗体,与重组蛋白的Western杂交表明该抗体能与GalUR蛋白发生特异反应。对猕猴桃可溶性蛋白杂交显示,猕猴桃体内GalUR蛋白的分子量约37kD。在猕猴桃不同组织和发育过程中,GalUR表达水平与AsA含量表现为高度一致,但前体饲喂发现,与L-半乳糖相比,D-半乳糖醛酸并不能有效促进猕猴桃AsA的合成。这些结果表明以单体形式存在的GalUR与猕猴桃AsA合成有着密切关系,但它可能并不是猕猴桃AsA积累的主要调控环节。