柯萨奇病毒A组16型衣壳蛋白VP1的原核表达

编号 zgly0001469528

文献类型 期刊论文

文献题名 柯萨奇病毒A组16型衣壳蛋白VP1的原核表达

作者 王云龙  米海  李玉林  王继创  程蕾  邓黎黎  张春艳  孙园园 

作者单位 河南工业大学  郑州职业技术学院  河南省生物工程技术研究中心 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2014年04期

年份 2014 

分类号 R373  Q78 

关键词 柯萨奇病毒  VP1基因  原核表达  蛋白纯化 

文摘内容 构建柯萨奇病毒A组16型(CVA16)衣壳蛋白VP1重组质粒pET-41a(+)/VP1,优化诱导表达条件,进行原核表达及蛋白纯化。通过PCR扩增获得VP1基因片段并转进大肠埃希菌E.coli BL21(DE3)内进行表达。从时间、温度、诱导剂浓度三个方面优化表达条件,收集表达菌体,经镍柱和DEAE柱纯化后,用蛋白印迹检测免疫反应性。结果表明,目的蛋白为包涵体,分子质量约为61ku,与设计蛋白分子质量大小相符,以诱导5h、IPTG的浓度为0.20mmoL/L、温度为37℃时蛋白表达量最高。纯化后蛋白纯度达到94%,蛋白印迹检测具有免疫反应性。试验成功获取了柯萨奇病毒A组16型(CVA16)VP1蛋白,且该蛋白具有免疫反应性。